Experiments in Bacterial Genetics: Un manual de laborator

Titlul original:

Experiments in Bacterial Genetics: A Laboratory Manual

Conținutul cărții:

Bacteriile sunt sisteme puternice pentru cercetarea genetică. Ele cresc rapid și sunt ușor de înmulțit și de întreținut, iar multe instrumente au fost dezvoltate pentru analizele genomice și manipularea lor genetică. Studiul bacteriilor și al virușilor acestora a permis descifrarea codului genetic și a modelat înțelegerea noastră a proceselor biologice fundamentale, cum ar fi replicarea, transcrierea și traducerea ADN.

Acest manual oferă o colecție de proceduri experimentale pentru cercetarea genetică în bacterii. Acesta descrie metodele de bază pentru izolarea și propagarea bacteriilor și a fagilor, purificarea ADN-ului genomic și a plasmidelor și introducerea ADN-ului în bacterii. Sunt descrise diverse strategii pentru generarea și confirmarea mutațiilor și pentru crearea de deleții și fuziuni de gene, utilizând tehnologii de schimb alelic, transpoziție aleatorie, recombinare și CRISPR-Cas. Sunt furnizate protocoale pentru secvențierea și resecvențierea genomului bacterian, precum și pentru screeningul mutanților de mare capacitate prin secvențierea transpozonilor.

Deși pentru unele dintre protocoale sunt utilizate specii bacteriene specifice, cum ar fi Escherichia coli, Salmonella enterica, Vibrio cholerae și Staphylococcus aureus, metodologiile descrise aici pot fi adaptate cu ușurință pentru utilizarea cu alte bacterii. Prin urmare, acest manual reprezintă o resursă valoroasă pentru cei care doresc să efectueze experimente genetice pe bacterii.